【摘 要】
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应用ISSR分子标记技术,对长柄双花木(Disanthus cercifolius var.longipes)5个南岭野生居群的遗传多样性进行了初步研究.采用改进的CTAB法,提取基因组DNA,并以此DNA为模
【机 构】
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广州大学生命科学学院,广州 510006
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应用ISSR分子标记技术,对长柄双花木(Disanthus cercifolius var.longipes)5个南岭野生居群的遗传多样性进行了初步研究.采用改进的CTAB法,提取基因组DNA,并以此DNA为模板,对ISSR的反应条件进行了优化,最终确定ISSR的反应体系为：20μL的反应体系含2μL 10×buffer,0.20mmol/LdNTPs,0.25mmol/L引物浓度,2.0 mmol/L Mg2+,1.0U Taq polyerase,约20ngDNA,14.1μL双蒸水.筛选出8条ISSR引物扩增出101条谱带,其中64条多态带,多态位点占63.37％.用POPGENEVersion1.31版软件对数据进行分析,结果显示：居群总的Neis基因多样性指数为0.2859,居群内基因多样性(Hs)为0.2741,长柄双花木总的遗传多样性水平较低.长柄双花木不同种群遗传多样性水平差异较大,居群多态位点百分率在60％～75％之间,Neis基因多样性指数为0.2695～0.2824,Shannon信息多态性指数为0.3845～0.3999.道县和莽山的遗传多样性水平较高.居群间的基因分化系数为0.0414,居群内的遗传变异大于居群间的遗传变异.用NTSYS 2.01版软件对样品进行UPGMA聚类分析,结果5个居群并没有按地理距离进行聚类.
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