【摘 要】
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目的:探讨氯化镉对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖以及其向神经元样细胞分化的影响,为镉的神经发育毒性研究提供理论依据.
方法:运用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充
【机 构】
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吉林大学公共卫生学院卫生毒理学教研室,长春,130021
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目的:探讨氯化镉对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖以及其向神经元样细胞分化的影响,为镉的神经发育毒性研究提供理论依据.
方法:运用全骨髓贴壁培养法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞.流式细胞仪检测第3代细胞表面标志抗体(CD44、CD90).MTT法检测不同浓度镉对骨髓间充质干细胞增殖的影响.根据48h半数致死浓度LC5o(以LC50的1/3作为起始浓度,进行2/3倍比稀释),以0.00μmol/L镉浓度为对照组,设4组不同浓度的镉(0.87μmol/L,0.58μmol/L,0.39μmol/L,0.26μmol/L)预处理骨髓间充质干细胞48h,用不含血清的DMEM-F12培养48h后,通过表皮生长因子(epithelial growth factor,EGF)、碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)联合维甲酸诱导骨髓间充质干细胞向神经样细胞分化,免疫组织化学方法检测微管相关蛋白MAP-2的表达.
结果:流式细胞仪检测结果显示,第3代细胞强表达CD44和CD90.MTT检测结果表明0.78μmol/L至200.00μmol/L镉暴露后,随着镉作用时间的增加,骨髓间充质干细胞的存活率逐渐减低;镉作用24h、48h和72h后半数致死浓度分别为6.12μmol/L,2.61 μmol/L,2.19μmol/L,.镉作用48h后,诱导BMSCs向神经细胞分化后,0.39μmol/L至0.87μmol/L镉浓度组细胞MAP-2阳性表达率显著低于对照组.
结论:在一定范围内,氯化镉对骨髓间充质干细胞的增殖具有显著的抑制作用,并影响其向神经元样细胞分化;表明镉不仅对干细胞增殖有毒性作用并具有影响干细胞分化的作用,骨髓间充质干细胞可作为检测镉神经发育毒性的理想细胞.
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