【摘 要】
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目的：探讨环状RNA100284 (circRNA100284)和微小RNA-217(miR-217)在亚砷酸钠(NaAsO2)急性处理人表皮(HaCaT)细胞所致细胞周期改变中的作用,为发现砷化物所致细胞损伤的生物学机制及寻找新的早期生物学标志提供科学线索.材料和方法：将0.0或1.0 μ M NaAsO2处理24 h的HaCaT细胞和1.0μ M NaAsO2处理30代所致恶性转化HaCaT细
【机 构】
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南京医科大学公共卫生学院卫生毒理学系,现代毒理学教育部重点实验室,南京211166
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目的：探讨环状RNA100284 (circRNA100284)和微小RNA-217(miR-217)在亚砷酸钠(NaAsO2)急性处理人表皮(HaCaT)细胞所致细胞周期改变中的作用,为发现砷化物所致细胞损伤的生物学机制及寻找新的早期生物学标志提供科学线索.材料和方法：将0.0或1.0 μ M NaAsO2处理24 h的HaCaT细胞和1.0μ M NaAsO2处理30代所致恶性转化HaCaT细胞进行环状RNA芯片检测,从而发现NaAsO2处理HaCaT细胞和恶性转化HaCaT细胞的环状RNA表达差异；1.0 μ M NaAsO2处理HaCaT细胞不同时间后,逆转录PCR (RT-PCR)和实时定量PCR (qRT-PCR)检测细胞circRNA100284水平,Western blots检测细胞EZH2、Cycli D1蛋白水平；染色质免疫共沉淀实验(Chip)验证EZH2与CyclinD1的启动子区结合；并应用生物信息学工具预测与circRNA100284结合的miRNA,qRT-PCR检测预测miRNA在HaCaT细胞中的表达水平；应用siRNA关闭circRNA100284和EZH2、转染mimic或inhibitor高表达或低表达miR-217后,进一步观察1.0 μ M NaAsO2处理所致HaCaT细胞EZH2、CyclinD1、circRNA100284和miR-217水平的影响；流式细胞仪观察细胞周期的变化.
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