【摘 要】
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目的：研究奇壬醇对人类慢性髓原白血病细胞K562凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法：MTT法检查K562细胞增殖;细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析细胞凋亡情况;Hoechst-33342染色观察细胞核片段化;流式细胞仪检测细胞周期,线粒体膜电位和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平;体外检测半胱天冬酶Caspase-3和Caspase-9的活性;Western Blo
【出 处】
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第九次全国中西医结合基础理论研究学术研讨会
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目的：研究奇壬醇对人类慢性髓原白血病细胞K562凋亡的影响,初步探讨其作用机制.方法：MTT法检查K562细胞增殖;细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻分析细胞凋亡情况;Hoechst-33342染色观察细胞核片段化;流式细胞仪检测细胞周期,线粒体膜电位和活性氧(Reactive oxygen species,ROS)的水平;体外检测半胱天冬酶Caspase-3和Caspase-9的活性;Western Blot检测Caspase-3、Caspase-8、聚腺苷二磷酸-核糖聚合酶(Poly-ADP-ribose polymerase,PARP)、细胞色素C、Bcl-2、Bid、Bax、p53、磷酸化p53(Ser 6和Ser 37)、p21蛋白的表达.结果：1、奇壬醇在24、48和72h的半数抑制浓度(IC50)分别为53.05μg/ml、18.19μg/ml和15.08μg/ml.2、奇壬醇导致细胞膜磷脂酰丝氨酸外翻,活性氧(ROS)累积,线粒体膜电位的降低,细胞色素C释放,下调Bcl-2的表达,上调Bax和tBid的水平.3、奇壬醇不影响Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9和PARP的活性或水平.4、奇壬醇诱导细胞周期阻滞在S期.5、奇壬醇上调磷酸化p53(Ser 6和Ser 37)和p21蛋白水平.结论：奇壬醇可以抑制K562细胞增殖、阻滞细胞周期于S期、诱导其凋亡.奇壬醇可不依赖Caspase,通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡.奇壬醇可促进K562细胞中ROS的累积,导致线粒体膜电位下降,诱导细胞色素C的释放,下调Bcl-2水平,上调Bax和tBid的表达.奇壬醇还可以促进K562细胞中磷酸化p53(Ser 6和Ser 37)和p21蛋白的表达.
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