三重实时荧光RT-PCR检测三种鱼类弹状病毒的研究

来源 :中国水产学会鱼病专业委员会第七次会员代表大会暨学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhongsichuang
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  鱼传染性造血器官坏死病病毒(Infectious hematopoietic necrosis virus,IHNV),鱼病毒性出血性败血症病毒(Viral hemorrhagic septicemia virus,VHSV)和鲤春病毒血症病毒(Spring Viraemia of Carp Virus,SVCV)是同属弹状病毒科(Rhabdoviridae)的三种鱼类病毒,也是影响水产养殖业的三种重要病毒。通过对这三种病毒基因序列的分析,在病毒基因的高保守区域,设计了三条分别针对这三种病毒的Taqman MGB探针,并选择三种无相互干扰的荧光基团进行标记。以此为基础建立起针对该三种病毒的三重实时荧光RT-PCR的检测方法。通过反应条件的优化,该三重实时荧光RT-PCR最低可检测至102拷贝/反应的病毒量。同时,该方法还对病毒混合感染EPC细胞(Epithelioma papulosum cyprini)和攻毒斑马鱼进行了检测。实验结果表明,该方法是一种特异、灵敏、高效的病毒检测方法。
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