【摘 要】
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本文以提高褐黄孢链霉菌原生质体再生率为主要目标,对P缓冲液中的渗透压稳定剂进行了初步的考察.并以R5再生培养基为基础,对其中的酪蛋白氨基酸、磷酸二氢钾和L-脯氨酸三
【机 构】
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天津科技大学生物工程学院,天津市工业微生物重点实验室,天津300457
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本文以提高褐黄孢链霉菌原生质体再生率为主要目标,对P缓冲液中的渗透压稳定剂进行了初步的考察.并以R5再生培养基为基础,对其中的酪蛋白氨基酸、磷酸二氢钾和L-脯氨酸三种营养物质的浓度进行了优化,进一步考察了向再生培养基中添加原生质体保护剂牛血清白蛋白和聚乙烯吡咯烷酮对再生的影响.结果表明:P缓冲液中蔗糖和氯化镁的最适浓度分别为103.00g/L和3.03g/L;相同的添加浓度下聚乙烯吡咯烷酮要比牛血清白蛋白更有效地促进再生.通过优化最终确定的再生培养基组成为:酪蛋白氨基酸0.10g/L,磷酸二氢钾0.13g/L,L-脯氨酸5.00g/L,聚乙烯吡咯烷酮0.20g/L,其他组分同RS’再生培养基。在此条件下,原生质体再生率可达16.5%,与优化前提高了166.1%。
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