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目的:本实验旨在通过体外实验,筛选出对甲状腺癌发挥作用的基因.以期为日后甲状腺癌基因及细胞功能学的进一步深入研究提供理论基础.
方法:在甲状腺癌细胞系SW-579中，加入含有16个靶基因慢病毒颗粒进行细胞感染实验。感染2-3天后，在荧光显微镜下观察细胞GFP表达情况，当荧光率需达到6080，孔内细胞密度达到80％时，对细胞进行拍照并收集细胞。利用cellomics全自动采集与图像数据分析的高通量筛选技术，检测感染病毒后表达GFP的目的细胞，并通过软件对拍照的图相进行分析处理，连续读板5天后，绘制出细胞生长曲线图。用Real-time PCR实验验证筛选出的CSE1L基因在SW-579细胞系中的本底表达量和shRNA的敲减效率。
结果:从shRNA文库中挑选了16个可能与肿瘤发展相关的基因。筛选结果显示，分别敲减RRS1和CSE1L可明显抑制SW-579细胞的增殖。计算第5天与第1天的细胞增殖倍数发现，相较于增殖抑制性阳性对照组(PC组)的增殖倍数3.18JRRS1增殖倍数2.84和CSE1L增殖倍数2.12均PC组。
结论:1CSElL基因在甲状腺癌细胞系sw579中可能起促进肿瘤细胞的增殖的作用。2在SW-579细胞系中，敲减CSE1L基因后可以将细胞周期阻滞在G1期，并促进细胞的凋亡。