论文部分内容阅读
以固定化功能蛋白质为核心的酶反应器、蛋白质微阵列、生物传感器以及亲和色谱技术对于揭示药物的体内外作用机制和开发创制新型药物具有重要意义.该技术中,功能蛋白质的纯化及固定化过程为首要制约因素.本研究针对功能蛋白质分离纯化与固定化的难点问题，拟建立一种高效简便的一步法纯化并固定功能蛋白质的新方法。通过基因工程手段将O6烷基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(O6-alkylguanine_DNAalkyltransferase，AGT)重组至血管紧张素Ⅱ受体Ⅰ型受体(Angiotensin receptor 1，AT1)的碳末端，获得含有AGT标签的AT1受体(AGT-AT1)。AGT以自身硫原子作为亲核试剂，将鸟嘌呤06-位的甲基以硫醚共价键的形式转移至自身活性中心，该反应在体内外均可发生，特异性强，产物稳定性高，不易分解。