新月弯孢霉原生质体的制备和育种

来源 :第二届全国发酵工程学术讨论会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:lu_bright_zhang
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以从自然界中筛选的新月弯孢霉(Curvularia lunata)D-1为出发菌株,进行原生质体紫外线诱变,选育氢化可的松高转化率菌株。将培养16h至快速生长期初期的D-1菌丝体悬浮于KCl高渗液中,用溶壁酶(l℅)和纤维素酶(1℅)在30℃下酶解4h,原生质体形成量可达到6×10<6>个/ml。当用紫外线照射该原生质体90s,致死率为80℅时,突变率最高,原生质体再生率为8.3℅。对获得的800多个突变株分别进行摇瓶初筛,用HPLC分析发酵液中氢化可的松的含量,筛选出转化率较高的菌株SY-1.该突变株缺乏气生菌丝形成能力。孢子色深、丰满,在液体培养基中能形成菌球。在给定的培养条件下,当底物RSA浓度为0.1℅时,转化48h,转化率可达到45℅,比出发菌株提高了50℅,具有潜在的应用价值。
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