高温酸性磷酸酶acp基因的克隆、表达和功能的初步鉴定

来源 :2006中国科协年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:asdfghjkg
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从高温塘泥(温度在40℃~85℃之间)中分离到一组嗜热微生物.提取环境基因组DNA,通过随机测序,发现许多基因与Thermus属的DNA相似性很高,根据Genbank上Thermus thermophilus HB8基因组序列中推定的酸性磷酸酶基因(TTHA1616)设计引物,PCR扩增得到一段798 bp的DNA序列,测序结果与Thermus thermophilus HB8基因组中酸性磷酸酶基因相似性达98%,含有完整的酸性磷酸酶保守区,于是我们将该基因在大肠杆菌中表达,得到一条约33 KD的特异蛋白条带,酶活检测证实该推定蛋白具有酸性磷酸酶活力.
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