【摘 要】
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目的:分析上海猪swChinash HEV与已知其它HEV基因型的差异和人源HEV的关系。方法:设计22对PCR引物，分片段进行扩增，两末端采用快速扩增方法(RACE)扩增，扩增产物克隆到pMD18-T载体并测序，用DNASTAR软件与53株人源和猪源HEV的基因组进行同源性分析，用Clustalx和Mega3.0软件绘制基因进化树。结果:swChinash全序列除去poly(A)尾，由7235个
【机 构】
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上海市动物疫病预防控制中心 上海 201103;南京农业大学南京 200095 上海市动物疫病预防
【出 处】
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中国畜牧兽医学会兽医公共卫生学分会成立大会暨第一次学术研讨会
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目的:分析上海猪swChinash HEV与已知其它HEV基因型的差异和人源HEV的关系。
方法:设计22对PCR引物，分片段进行扩增，两末端采用快速扩增方法(RACE)扩增，扩增产物克隆到pMD18-T载体并测序，用DNASTAR软件与53株人源和猪源HEV的基因组进行同源性分析，用Clustalx和Mega3.0软件绘制基因进化树。
结果:swChinash全序列除去poly(A)尾，由7235个核苷酸组成，ORF1-3分别编码1707，660，122个氨基酸。全基因序列与Ⅳ型的核苷酸同源性为83.4％～84.7％，与其他三型为73.3％～76.3％，其中与中国人源长春株最高，为84.7％。
结论:基于ORF1～3和全长基因组的进化树，猪HEV上海株swChinash属于基因Ⅳ型，与其他Ⅳ型HEV亲缘关系较远，单独在一个进化分支上。
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为探讨猪链球菌2型(Streptococcus suis typc2，SS2)次黄嘌呤核苷酸脱氢酶(IMPDH)的生物学特性及其致病的相关性，选用自杀性质粒，通过同源重组成功构建具有氯霉素基因缺失株IMPDHm。PCR鉴定，IMPDH基因被cat基因表达盒所代替；Western blot鉴定，IMPDH单抗没有检测到相应的IMPDH蛋白。IMPDHm培养特性和致病性发生较明显的变化，其利用糖的能力
本研究采用PCR技术扩增了鹅和番鸭全长细小病毒基因；其中鹅和番鸭细小病毒非结构基因(NS)全长为1884bp，编码627个氨基酸；结构基因(VP)全长为2199bp，编码732个氨基酸；序列分析表明：鹅和番鸭细小病毒NS间的核苷酸和氨基酸同源性分别为80.9％～82.9％和89.5％～91.2％，而相应的鹅细小病毒间的同源性为93.7％～99.8％和96.8％～99.7％，番鸭细小病毒间的同源性为
利用MDBK细胞从临床表现典型口疮症状的病羊痂皮材料中分离获得1株病毒，通过形态学、理化学、PCR检测与动物回归试验等对该株病毒进行系统的分离鉴定后，证实该分离株为羊传染性脓疱病毒(Off virus，ORFV)，命名为ORFV-sy。参照Genbank中羊传染性脓疱病毒的B2L、F1L基因的核苷酸序列，设计合成特异性引物，成功地对ORFV-sy株的B2L和F1L基因进行克隆、测序，并推导出其相应
根据B病毒E2490株(登录号AF533768)人工合成猴B病毒gB基因，通过XbaI和EcoRI特异性酶切，将其亚克隆于昆虫杆状病毒表达载体pFastBacHTA，经PCR、酶切及测序鉴定。表明构建了猴B病毒gB基因杆状病毒表达重组质粒pFastHTA-gB。在此基础上，重组质粒转化DH10Bac感受态细胞，经平板抗性筛选，PcR鉴定，表明获得了转座的杆粒，为下一步进行昆虫细胞的转染和以猴B病毒
通过应用酶联免疫吸附试验(Enzyme-Linked immunity assay，ELISA)方法。对青海农区猪繁殖与呼吸综合征(Porcine reproduction and respiratory syndrome，PRRS)进行血清流行病学调查。五年来(2003年-2007年)所采集猪血样9788份，用美国IDEXX公司的血清PRRSV抗体检测试剂盒检测，其血清抗体阳性率是10.6％。结
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