【摘 要】
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为研究获得抗猪瘟病毒转基因猪，本研究设计了靶向猪Jiv基因的4个shRNA干扰片段，获得4个重组慢病毒，分别感染PK-15细胞，筛选获得阳性细胞，扩大培养后猪瘟病毒，在接毒后72h对病毒
【机 构】
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西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌 712100
【出 处】
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中国畜牧兽医学会畜牧兽医生物技术学分会暨中国免疫学会兽医免疫分会第九次学术研讨会
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为研究获得抗猪瘟病毒转基因猪，本研究设计了靶向猪Jiv基因的4个shRNA干扰片段，获得4个重组慢病毒，分别感染PK-15细胞，筛选获得阳性细胞，扩大培养后猪瘟病毒，在接毒后72h对病毒进行检测，比较其对猪瘟病毒的干扰效果。将对猪瘟病毒有较好干扰的重组慢病毒转入猪胎儿成纤维细胞中，流式细胞术筛选获得阳性细胞，作为抗猪瘟转基因猪研究的供体细胞，经处理后将细胞核移植到成熟的去核注卵母细胞中，获得体细胞核移植胚胎，移植入发情的受体母猪输卵管中进行转基因猪生产。结果显示，转入慢病毒(P2)的PK-15细胞对猪瘟病毒的增殖有明显的抑制作用，故将转入慢病毒P2的猪胎儿成纤维细胞作为抗猪瘟转基因猪的供体细胞，妊娠期满后，获得一头转基因克隆仔猪(临产前死亡)，对其心脏、肝脏、脾脏、肾脏、肺脏、脑等组织中外源插入基因的鉴定表明，该猪为转入干扰Jiv基因干扰载体(P2)的转基因猪。
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