【摘 要】
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目的：探讨糖原合成激酶3β(GSK3β)在甲基苯丙胺(METH,Methamphetamine)诱导的神经退行性变中的作用机制.方法：选择大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)和人神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y)为研究对象,设置不同浓度梯度及时间梯度的甲基苯丙胺溶液分别处理细胞,使用Western blot检测GSK3β的水平及活性变化(即磷酸化GSK-3β)、以及相关分子α-syn、磷酸化α
【机 构】
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南方医科大学法医学院,广州,510515
【出 处】
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第十四届全国药物依赖性学术会议暨国际精神疾病研讨会
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目的：探讨糖原合成激酶3β(GSK3β)在甲基苯丙胺(METH,Methamphetamine)诱导的神经退行性变中的作用机制.方法：选择大鼠肾上腺髓质嗜铬细胞瘤细胞(PC12)和人神经母细胞瘤细胞(SHSY-5Y)为研究对象,设置不同浓度梯度及时间梯度的甲基苯丙胺溶液分别处理细胞,使用Western blot检测GSK3β的水平及活性变化(即磷酸化GSK-3β)、以及相关分子α-syn、磷酸化α-syn、tau、磷酸化tau的活性表达情况；为了探讨GSK3β、α-syn在甲基苯丙胺诱导的神经退行性变的关系及相关机制,甲基苯丙胺处理后使用抑制剂Licl抑制GSK(3β的活性,光镜下观察细胞形态学改变,CCK8检测细胞活力改变,流式细胞术检测细胞凋亡率改变,Western blot检测上述分子的表达变化情况；为进一步探究GSK3β、α-syn、tau三者之间关系,用免疫荧光染色检测三者之间的共定位表达情况.结果：甲基苯丙胺处理的PC12细胞及SHSY5Y细胞中总GSK3β、总tau蛋白水平没有变化,磷酸化GSK-3β水平升高,磷酸化tau水平升高,α-syn及磷酸化α-syn表达均升高.使用Licl抑制GSK-3β活性后,与甲基苯丙胺处理组相比,磷酸化tau、α-syn及磷酸化α-syn水平表达均明显下降,细胞活力增加,细胞形态学损伤减轻,细胞凋亡率减少.免疫荧光染色磷酸化GSK-3β、α-syn、磷酸化tau免疫荧光表达增强,三者在细胞浆内共定位.结论：METH能通过激活GSK3β,影响α-syn的变化,并依靠其磷酸化修饰与α-syn、tau产生相互作用,介导甲基苯丙胺诱导的神经毒性,产生与神经退行疾病相似的作用.Licl能保护METH所致的毒性损伤.PH a.m.
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