【摘 要】
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H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的
【机 构】
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中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,哈尔滨,150001
【出 处】
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中国畜牧兽医学会生物制品学分会第十次学术研讨会
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H5N1亚型高致病性禽流感给我国以及东南亚地区的养禽业造成了巨大的经济损失,疫苗免疫接种是控制本病流行的最有效手段.本研究采用RT-PCR技术分别扩增了鹅源高产禽流感病毒的6条内部基因片断,近期分离的H5N1亚型禽流感病毒的血凝素基因以及N3亚型参考毒株的神经氨酸酶基因,分别构建了8个基因的转录与表达载体,利用反向遗传学技术拯救出了全部基因,且都来自于禽源的重组流感病毒疫苗株rH5N3.通过对血凝素基因连接肽处的4个碱性氨基酸(R-R-K-K)基因缺失,消除了HA基因的毒力相关序列,拯救出的rH5N3病毒对鸡和鸡胚均无致病性,鸡胚尿囊液的HA效价1∶2048,比亲本病毒产量提高8倍.疫苗免疫鸡后2周即可检出HI抗体,免疫后4周左右HI抗体水平最高,鸡免疫后18周应然保持高水平的HI抗体.以rH5N3制备的油乳剂灭活苗免疫不论是对于国内早期分离的禽流感病毒A/Goose/Guangdong/1/96还是近期分离的A/Goose/HLJ/QFY/04都能够产生良好的免疫保护作用,免疫鸡攻毒后不排毒、不发病、不死亡.
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