【摘 要】
：
目的:构建致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库并进行EST测序,通过生物信息学软件分析EST序列同源性及生物学功能,并对其中具有毒力作用的基因进行体外克隆并诱导表达. 方法:
【机 构】
：
110032沈阳,中国医科大学附属第四医院呼吸内科
【出 处】
：
第六届全国慢性阻塞性肺疾病学术会议
论文部分内容阅读
目的:构建致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库并进行EST测序,通过生物信息学软件分析EST序列同源性及生物学功能,并对其中具有毒力作用的基因进行体外克隆并诱导表达.
方法:利用SMART方法构建致农民肺嗜热吸水链霉菌的cDNA文库,并从中随机挑选了1020个克隆进行EST测序.用生物信息学方法分析EST测序结果,并筛选出可能引起人体免疫反应的毒力因子.将这些目的基因克隆至pET-28a载体中,在大肠杆菌BL2(DE3)中转化,通过IPTG进行诱导蛋白质的表达.
结果:成功构建了含有978个有义序列,347个单一基因的较高质量的致农民肺嗜热吸水链霉菌cDNA文库.该cDNA文库中含有两段全长分别为1713bp和768bp,并编码517和254个氨基酸的基因,这两段基因与猪胸膜肺炎放线菌外膜蛋白(omla),转铁蛋白B(TbpB)的同源性分别为51％和42％.将这两段基因克隆至原核表达载体中,用宿主IPTG诱导得到表达产物的分子量分别为63kDa和30kDa.
结论:所构建的致农民肺嗜熟吸水链霉菌cDNA文库包含全部EST序列,可能包含嗜热吸水链霉菌相关疾病巨大部分毒力分子,这些数据的积累将有助于农民肺特异性毒力分子的进一步筛选,同时为研究农民肺的发病机制奠定基础,如果能准确筛选出相关毒力基因,将为农民肺血清学诊断以及特异性疫苗的研发奠定基础.
其他文献
我的物理老师名叫叶正勇.虽然到了快退休的年纪,但他却站姿挺拔如松,声音雄浑如钟,精神饱满得如同年轻小伙.岁月使叶老师的头发稀疏而花白,我们常看见他冬天戴着一顶黑色鸭舌
记=本刊记者朱诗琪实习记者潘聪rn肖=肖新宇rn“爱好变成工作,能让我对工作非常有热情”rn记:您中学时是一个幽默的人吗?rn肖:不是.我觉得我可能是一个比较中庸的人,不能说特
1957年 9月北京天文馆开馆前夕 ,我与几位南大天文系应届毕业的同学分配到馆工作。时值李鉴澄先生应首任馆长陈遵妫先生之邀 ,从东北举家来到北京 ,出任天文馆研究员。令我至
目的:应用RAb1 siRNA处理大鼠肺动脉平滑肌细胞(RPASMCs),观察低氧处理后RPASMCs的表型转化以及血管紧张素Ⅱ1型受体(ATIR)对其表型转化的影响,探讨RAb1在RPASMCs表型转化中
1895年12月28日,法国卢米埃尔兄弟在巴黎的咖啡馆播放《火车到站》,标志着电影的正式诞生.rn100多年来,电影历经了多次伟大的变革:从无声到有声,从黑白到彩色,从现实拍摄到三
青春期是青少年生长发育出现迅速突增的阶段,一般女孩比男孩要早2年进入突增期。在这个时期中,不仅身高、体重增长迅速,而且生理上也发生一系列的变化。此时女孩的乳房发育
Objective Using high-resolution solid-state manometry,we examined biomechanic changes of physiologic swallowing events in patients with dysphagia after brai
德国的大学以“宽进严出”的办学方式闻名，虽然入学门槛相对较低，但想要顺利毕业却不容易。某些要求严格的专业，最终能拿到毕业证书的学生还不到三成。哪怕平时成绩不错的同学，临近毕业因为在一门“杀手”课上挂科三次无奈退学的案例不在少数。 历经半年克服语言关，我终于如愿以偿地被录取为杜伊斯堡-埃森大学的研究生，踌躇满志的我当时根本没想到给自己挖了一个多大的坑。 “刺激”的研讨课 研讨课是西方教育体
<正> 1989年的那场政治风波以后,人们冷静地反思过去,同时也思索着几年来我们在人生观、价值观和道德观教育方面存在的问题。今天我们已越来越清楚地看到,个人主义思潮的泛滥是那场政治风波产生的重要思想根源。资产阶级个人主义是资产阶级自由化的思想基础。集体主义同个人主义的对立和斗争是根源于无产阶级同资产阶级的对立和斗争,是根源予走社会主义道路,还是走资本主义道路的对立和斗争。要坚持走社会主义道