【摘 要】
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研究背景:免疫受体介导免疫细胞间的相互作用,具有重要的生理和病理作用。VSTM1(V-set and transmembrane domain containing 1)是我室通过免疫基因组学策略发现的一个新型免
【机 构】
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北京大学基础医学院免疫学系,卫生部医学免疫学重点实验室,北京大学人类疾病基因研究中心;
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研究背景:免疫受体介导免疫细胞间的相互作用,具有重要的生理和病理作用。VSTM1(V-set and transmembrane domain containing 1)是我室通过免疫基因组学策略发现的一个新型免疫分子编码基因。VSTM1-v1是其最主要的编码产物,为Ⅰ型膜分子,胞内区含有两个免疫受体酪氨酸抑制基序(ITIM)。VSTM1-v1在人外周血粒细胞和单核细胞中高表达,抑制粒细胞的功能。但其在绝大多数造血系统肿瘤来源的细胞系中表达缺失,且与启动子区的甲基化密切相关。研究目的:鉴定人类新免疫抑制受体VSTM1-v1在正常人外周血淋巴细胞中的表达及其对Jurkat细胞增殖的影响。研究方法:使用重组原核蛋白免疫家兔,制备抗VSTM1抗体,鉴定其对抗原的识别能力及交联活性。分离人外周血淋巴细胞,使用PHA对其进行体外活化,通过半定量RT-PCR,定量RT-PCR,流式细胞术及Western blot等方法检测VSTM1-v1的表达。构建VSTM1-v1真核表达质粒,转染至人急性淋巴性白血病细胞系Jurkat中,通过CCK8法观察其对细胞增殖的影响。进一步利用抗体对超表达于Jurkat细胞表面的VSTM1-v1进行交联,通过CCK8法观察该分子交联后对细胞增殖的影响。研究结果:VSTM1不仅高表达于人外周血粒细胞和单核细胞,在淋巴细胞中也有表达但存在较大个体差异,表达形式也不同于粒细胞。淋巴细胞活化后其表达明显下调。超表达VSTM1-v1可抑制Jurkat细胞增殖,利用抗体对其进行交联后抑制增殖的效果更加明显。结论:VSTM1-v1在淋巴细胞中的表达水平存在较大的个体差异,且活化后明显下调;胞外区交联后可发挥抑制活性,具有免疫抑制受体的特点。
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