脂肪源干细胞、口腔黏膜干细胞在温度敏感性支架材料上体外培养的实验研究

• 作 者: 韦巧玲;徐建江;
• 出 处: 第十二届全国角膜及眼表疾病学术大会暨第四届全国角膜屈光手术大会
• 发表日期: 2012年期

　　目的：在温度敏感性材料上培养脂肪源干细胞(Adipose-Derived Stem Cell,ADSCs)及口腔黏膜上皮细胞(Oral mucosal epithelial cells,OMECs),通过比较两种细胞体外的生长情况和生长特性,探求脂肪源干细胞作为重建眼表的种子细胞的可能性。方法：异丙基丙烯酰胺溶于二丙醇加入35mm直径的培养皿,利用电子束照射制备温度敏感性培养皿。取兔脂肪组织及口腔黏膜,分别消化、离心获取原代细胞,ADSCs体外培养至二代后接种于温敏材料,原代OMECs直接接种子有丝裂霉素C处理过的鼠3T3生长的温敏材料中,比较两种细胞的形态、生长速度、细胞层片脱附时间、层片细胞计数、HE染色、干细胞荧光标志物ABCG2及角蛋白CK3/2P免疫染色,及扫描电镜检查。结果：ADSCs镜下呈长梭形,OMECs呈鹅卵石外观,两者覆盖率达100％所需生长周期分别是10～12天、14～16天,20℃下脱附时间分别是45分钟、90分钟,HE染色前者呈单至双侧、后者呈3～5层,两者ABCG2、CK3/2P均呈阳性,扫描电镜显示ADSCs细胞表面平滑、细胞间连接紧密,OMECs细胞可见典型微绒毛结构、细胞间连接紧密。结论：脂肪源干细胞联合细胞层片技术可作为眼表重建的新途径。