【摘 要】
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围食膜蛋白是构成围食膜的重要成分之一,在围食膜功能发挥过程中具有举足轻重的作用.本研究以前期已获中华绒螯蟹围食膜蛋白基因的部分序列为基础,利用cDNA末端快速扩增法获得了两种围食膜蛋白基因的全长cDNA序列,并命名为Es-peritrophin1和ES-peritrophin2.结果 显示,Es-peritrophin1和ES-peritrophin2基因cDNA序列全长分别为855bp和1611
【机 构】
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苏州大学医学部基础医学与生物科学学院,苏州215123
【出 处】
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第十届世界华人虾蟹养殖研讨会暨2016年中国河蟹产业发展高峰论坛
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围食膜蛋白是构成围食膜的重要成分之一,在围食膜功能发挥过程中具有举足轻重的作用.本研究以前期已获中华绒螯蟹围食膜蛋白基因的部分序列为基础,利用cDNA末端快速扩增法获得了两种围食膜蛋白基因的全长cDNA序列,并命名为Es-peritrophin1和ES-peritrophin2.结果 显示,Es-peritrophin1和ES-peritrophin2基因cDNA序列全长分别为855bp和1611bp,分别编码267和468个氨基酸的蛋白.氨基酸序列分析表明,Es-peritrophin1和ES-peritrophin2N端都含有一个信号肽序列,属于分泌性蛋白.蛋白质结构域分析表明,Es-peritrophin1和Es-peritrophin2分别含有3个和1个几丁质结合功能域(CBD).序列比对发现,Es-peritrophin1与豌豆蚜peritrophins 3-B precursor相似性最高为56％.Es-peritrophin2与赤拟谷盗peritrophins 1-H Precursor相似性最高为70％.多序列比对发现,Es-peritrophin1和Es-peritrophin2与斑节对虾卵巢围食膜1,斑节对虾卵巢围食膜2和对虾围食膜1的一致性很低,分别为16.32％和10.71％,14.02％和7.49％,17.01％和10.28％,是两种新型的围食膜蛋白.把所获得基因全长cDNA序列提交至NCBI文库,获得了两条GenBank登录号分别为：KU041138和KU041139.通过定量RT-qPCR对两种基因在不同组织的表达情况进行了分析,结果表明,Es-peritrophin1基因在胃、后肠、性腺和肌肉中高表达,Es-peritrophin2基因在胃、性腺和肌肉中高表达；两种基因在中肠、肠球、腮、心和肝胰腺中表达量较低.研究提示,Es-pefitrophin1和ES-peritrophin2是两种新型的围食膜蛋白,与已有的昆虫围食膜蛋白具有一定的差异,其生理、生化功能以及分类地位有待进一步的研究.
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微生物普遍存在于健康的甲壳动物血淋巴中,而对血淋巴中微生物菌群丰度的计数缺乏准确的方法.本研究开发一种基于荧光显微术和过滤原理来计数甲壳动物血淋巴微生物丰度的方法,该方法用荧光显微镜直接观察计数微生物,并可以有效去除血淋巴中的血细胞对微生物细胞计数的干扰.与目前报道较多的微生物平板菌落计数法和稀释培养计数法相比具有更高的准确性.本研究以健康拟穴青蟹为对象,为了减少外界环境及不同的食物来源对青蟹血淋
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