论文部分内容阅读
目的 观察热暴露下大鼠胸主动脉、肝脏和心肌组织结构变化及胸主动脉内皮细胞钟基因BMAL1 表达水平的改变,为高温高湿环境下探讨钟基因对心血管功能影响的机制提供实验基础.方法 体内实验：选用雄性Sprague Dawley(SD)大鼠20 只,随机分为：正常对照组和热暴露组.对照组环境温度为24℃,热暴露组环境温度为32℃,14天.HE 染色观察大鼠胸主动脉、肝脏和心肌组织病理变化,IHC 检测大鼠胸主动脉、肝脏、心肌和胸主动脉内皮细胞BMAL1 表达情况,WB 检测BMAL1 的表达.体外实验采用大鼠胸主动脉内皮细胞(Rat Thoracic Aortic Endothelial Cell,RTAEC)细胞株,实验分为两组：对照组和热暴露组,其中对照组为正常对照组37℃细胞培养,热暴露组细胞培养温度为40℃,并用WB 检测BMAL1 的表达.结果 体内实验：与正常对照组大鼠相比,热暴露组体重变化不明显,两组间无显著性差异(P＞0.05)； HE 结果显示：正常对照组大鼠胸主动脉血管管壁完整,热暴露组血管内皮细胞明显缺失,弹性纤维紊乱、断裂； 正常对照组大鼠肝血窦呈条索状,排列紧密,肝细胞形态正常,核深染,胞质均匀,可见少量细胞分裂增殖的表现,热暴露组肝组织肝血窦排列紊乱,肝细胞水肿,嗜酸性变,可见少量细胞分裂增值表现；正常对照组大鼠心肌纤维细长排列整齐并相互连接成网状,心肌纤维间有少量结缔组织,细胞核椭圆形,位于细胞中央,热暴露组大鼠心肌纤维排列紊乱,浊肿不清,横纹消失,大量炎细胞浸润；IHC 结果显示：与正常对照组组比较,热暴露组大鼠胸主动脉血管组织BMAL1 阳性表达增多； WesternBlot 结果显示：与正常组比较,热暴露组大鼠胸主动脉血管和胸主动脉内皮细胞组织BMAL1 蛋白表达升高(P＜0.05),肝脏和心肌组织BMAL1 蛋白表达降低(P＜0.05).体外实验：Western Blot 结果显示：与正常组比较,热暴露组大鼠胸主动脉内皮细胞BMAL1 蛋白表达升高(P＜0.05).结论 热暴露可以引起大鼠胸主动脉、肝脏、心肌组织结构紊乱；大鼠胸主动脉、肝脏、心肌和胸主动脉内皮细胞钟基因BMAL1 蛋白表达变化明显,且在胸主动脉和胸主动脉内皮细胞的体内外实验结果呈现一致,提示热暴露可以改变不同组织钟基因的表达水平,可能通过影响钟基因表达来影响不同组织器官的功能.