【摘 要】
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目的 拟在屋尘螨所致细胞和动物哮喘模型中评估HSP90表达及参与上皮屏障破坏的可能作用.方法 建立HDM哮喘C57bl小鼠模型和培养正常人支气管上皮细胞株16HBE及BEAS-2B细胞HDM刺激模型.通过HE染色检测小鼠模型制作是否成功；IHC检测屏障蛋白、HSP90α、HSP90β；elisa法检测灌洗液eHsp90α、IL-4、血清IgE；Western Blot法检测细胞、肺组织连接蛋白、H
【机 构】
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南方医科大学南方医院呼吸与危重症医学科,慢性气道疾病实验室,广东广州 510515
【出 处】
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广东省医学会第十八次呼吸病学学术会议暨2015岭南呼吸论坛
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目的 拟在屋尘螨所致细胞和动物哮喘模型中评估HSP90表达及参与上皮屏障破坏的可能作用.方法 建立HDM哮喘C57bl小鼠模型和培养正常人支气管上皮细胞株16HBE及BEAS-2B细胞HDM刺激模型.通过HE染色检测小鼠模型制作是否成功；IHC检测屏障蛋白、HSP90α、HSP90β；elisa法检测灌洗液eHsp90α、IL-4、血清IgE；Western Blot法检测细胞、肺组织连接蛋白、Hsp90α、HSP90β等表达水平.检测细胞跨膜电阻(TEER)和FITC-右旋糖酐透过率评估屏障功能，；免疫荧光法检测连接蛋白分布情况.ELISA法检测细胞上清中的eHsp90α释放水平.结果 哮喘动物模型制作成功，屏障蛋白破坏；肺组织HSP90α表达增加，灌洗液中eHsp90α、IL-4和血清IgE释放均增加.体外实验示HDM可致上皮细胞TEER下降和FITC-右旋糖苷通透性增加；细胞连接蛋白表达减少和分布异常，同时HDM可引起细胞全Hsp90α表达增加和eHsp90α释放水平增加.结论 eHsp90α在HDM所致哮喘动物和细胞模型中显著上调表达，可能参与了气道上皮屏障的破坏.
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