【摘 要】
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The study was to map the linear B-cell epitopes on Eastern equine encephalitis virus (EEEV) E2 glycoprotein by pepscan.The preparation of recombinant EEEV E2 glycoprotein was according to the instruct
【机 构】
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The Key Laboratory of Veterinary Public Health, Ministry of Agriculture, State Key Laboratory of Vet
【出 处】
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2012年中国畜牧兽医学会兽医病理学分会暨中国病理生理学会动物病理生理专业委员会学术研讨会
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The study was to map the linear B-cell epitopes on Eastern equine encephalitis virus (EEEV) E2 glycoprotein by pepscan.The preparation of recombinant EEEV E2 glycoprotein was according to the instructions of the Bac-to-Bac~ Baculovirus Expression System and Ni-nitrilotriacetic acid affinity chromatography was used for the purification.The purified recombinant EEEV E2 protein was used as antigen for the generation of E2-specific pAbs and mAbs.The E2 protein-reactive antibody titers of the final immunization demonstrated that the titer of pAbs was over 1∶106 and 51 hybridomas stably secreting mAbs against E2 protein were developed by indirect ELISA and WB.The IFA with Sf9 insect cells infected with BACV-E2 showed that all the 51 mAbs could react positively with EEEV E2 protein whereas no reaction was detected on the Sf9 cells infected with wild type baculovirus.However, the IFA with BHK transfected with pShuttle-E2 demonstrated a different result that 45 mAbs could react positively with EEEV E2 protein while no reaction was found on other 6 mAbs.The heavy chain subtypes of 51 mAbs contained IgGl, Ig2a and lgM with only one type light chain, aκ light chain.
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