【摘 要】
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本研究旨在将鸡IL-18基因作为细胞因子佐剂与柔嫩艾美耳球虫EtMIC2基因串联到真核表达载体pVAXl.0上构建核酸疫苗,并免疫鸡检测其免疫保护力.利用DNA重组技术,将EtMIC2基因、
【出 处】
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中国畜牧兽医学会家畜寄生虫学分会第七次代表大会暨第十二次学术研讨会
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本研究旨在将鸡IL-18基因作为细胞因子佐剂与柔嫩艾美耳球虫EtMIC2基因串联到真核表达载体pVAXl.0上构建核酸疫苗,并免疫鸡检测其免疫保护力.利用DNA重组技术,将EtMIC2基因、鸡IL-18基因单独或串联到真核表达载体pVAXl.0上,经酶切鉴定,成功构建了pVAX-MIC2、pVAX-IL-18、pVAX-MIC2-IL-18重组质粒.将各重组质粒用转染试剂Lipofectamine 2000转入293T细胞,并于转染24h后固定细胞进行IFA检测,裂解收集细胞进行Western-blot检测重组质粒在体外的表达情况.通过ELISA检测小鼠血清中特异性抗体明显升高,表明重组质粒在动物体内表达.保护力实验证实串联表达IL-18&EtMIC2免疫保护效果明显高于单独表达组.研究表明,IL-18基因作为细胞因子佐剂的EtMIC2基因串联真核表达DNA疫苗候选株的构建,为研制预防鸡球虫病的基因工程疫苗奠定了基础.
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