【摘 要】
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目的:研究新型非病毒载体葡聚糖-精胺阳离子聚合物(DSP)的制备方法以及对体外细胞转染率。方法:葡聚糖氧化后,通过还原胺法与精胺反应制得DSP,与质粒pEGFP在室温孵育后形成复合物;用激光粒度仪测定其粒径和Zeta电位,用琼脂糖凝胶电泳观察DSP对DNA的阻滞能力;用荧光倒置显微镜考察了复合物对SMMC-7721肝癌细胞,BHK细胞的转染情况并计算转染率。结果: DSP与DNA在质量比大于4时,
【机 构】
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南方医科大学南方医院药学部 南方医科大学生物技术学院,广州 广东 510515
【出 处】
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广州医药2006年两岸药学(羊城)论坛
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目的:研究新型非病毒载体葡聚糖-精胺阳离子聚合物(DSP)的制备方法以及对体外细胞转染率。
方法:葡聚糖氧化后,通过还原胺法与精胺反应制得DSP,与质粒pEGFP在室温孵育后形成复合物;用激光粒度仪测定其粒径和Zeta电位,用琼脂糖凝胶电泳观察DSP对DNA的阻滞能力;用荧光倒置显微镜考察了复合物对SMMC-7721肝癌细胞,BHK细胞的转染情况并计算转染率。
结果: DSP与DNA在质量比大于4时,能形成稳定的复合物;复合物平均粒径为173.6nm,平均电位为23.2mV;复合物在质量比为8时对SMMC-7721肝癌细胞、BHK-21细胞的染率最高,分别为27%及22%。
结论:葡聚糖-精胺阳离子聚合物是一种制备工艺简单,体外转染效率高的基因载体。
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