【摘 要】
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设计分步导入洗脱程序,对脐血造血干/祖细胞进行玻璃化低温保存。对照组采用10％DMSO，1℃/min降温速率对细胞进行慢冻保存。利用冷台对保护剂的玻璃化过程进行可视化研究。复苏
【机 构】
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大连理工大学干细胞与组织工程实验室,辽宁 大连 116024
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设计分步导入洗脱程序,对脐血造血干/祖细胞进行玻璃化低温保存。对照组采用10％DMSO，1℃/min降温速率对细胞进行慢冻保存。利用冷台对保护剂的玻璃化过程进行可视化研究。复苏后细胞用台盼蓝拒染法计活率,并用流式细胞仪对CD34+细胞进行表面抗原鉴定计数。结果表明:联合玻璃化保护剂在降温速率和复温速率均为100℃/min时,可以实现完全玻璃化,且仅有轻微短暂的反玻璃化现象。五步导入保护剂,每步平衡90s,细胞活率为83.0±1.2％。洗脱时,五步导出,每步平衡60s，且加入0.5M 海藻糖溶液,可以显著提高细胞回收率。单核细胞经由玻璃化低温保存,平均回收率为81.5±1.7％,与传统慢速冻存法的细胞回收率74.7±2.6％相比,具有显著性差异。两种方法的CD34+细胞回收率分别为32.5±4.6％和30.7±2.2％,无明显差异。
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