【摘 要】
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促甲状腺激素受体(TSHR)是一种G蛋白偶联受体,主要功能为调节甲状腺激素的合成、储存和分泌.目前对鱼类TSHR基因及其在生理生化过程中所起的作用研究非常有限,本研究的第一个目的是获得大口黑鲈TSHR基因的cDNA全长序列,并掌握TSHR基因的组织表达差异,此外,鉴于甲状腺激素有调节鱼类新陈代谢的速率的作用,进而可能会导致鱼类的日常营养状况对TSHR基因的表达产生影响,因此本研究的第二个目的是揭示
【机 构】
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浙江万里学院生物与环境学院,浙江省宁波市,315100 宁波卫生职业技术学院,浙江省宁波市,315
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促甲状腺激素受体(TSHR)是一种G蛋白偶联受体,主要功能为调节甲状腺激素的合成、储存和分泌.目前对鱼类TSHR基因及其在生理生化过程中所起的作用研究非常有限,本研究的第一个目的是获得大口黑鲈TSHR基因的cDNA全长序列,并掌握TSHR基因的组织表达差异,此外,鉴于甲状腺激素有调节鱼类新陈代谢的速率的作用,进而可能会导致鱼类的日常营养状况对TSHR基因的表达产生影响,因此本研究的第二个目的是揭示大口黑鲈摄食前后TSHR基因表达的变化情况.本研究采用RACE技术克隆TSHR基因cDNA全长序列,并应用荧光定量PCR技术检测基因的表达水平.在投喂试验中采用两组鱼,一组为对照组,一组为试验组,每组放入40尾大口黑鲈,对照组在采样期间不投喂饲料,而试验组投喂一次饲料,采样分别在投喂前1小时,投喂后0小时,投喂后1小时,投喂后2小时,投喂后4小时,投喂后6小时,投喂后12小时和投喂后24小时共8个时间点进行,采样在对照组的试验组同时进行.本研究结果成功克隆得到TSHR基因cDNA的全长序列,长度为2743 bp,其中开放阅读框2340 bp,编码779个氨基酸,Blast程序分析表明TSHR氨基酸序列与其它鱼类已知序列的相似性为58.4％～90.2％,分歧度为5.6～125.8,进化树分析结果表明大口黑鲈与条纹鲈在同一个进化技上.组织表达分析表明TSHR基因在甲状腺组织和非甲状腺组织中均有表达,其中脾脏、头肾和肾中的表达丰度较高.投喂试验结果表明日常的饲料投喂对大口黑鲈甲状腺TSHR基因的表达无显著影响,这一结果也预示着日常的营养状况与甲状腺TSHR基因表达水平无直接联系.
其他文献
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