【摘 要】
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目的:建立并优化花椒的RAPD-PCR反应体系. 方法:以汉源花椒DNA为材料,采用正交实验对Mg2+、dNTP、DNA、引物,TaqE等反应条件进行优化. 结果:花椒的PCR反应体系为25μl,
【机 构】
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成都中医药大学药学院,四川成都611137
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目的:建立并优化花椒的RAPD-PCR反应体系.
方法:以汉源花椒DNA为材料,采用正交实验对Mg2+、dNTP、DNA、引物,TaqE等反应条件进行优化.
结果:花椒的PCR反应体系为25μl,包括ddH20 13.5μl、25mmol/L的MgCh 2μl、2.5mmol/L的dNTPs 2μl、10×Buffer 3μl、10ng/μl的引物2μl、DNA 2μl、5U TaqE0.5μl;PCR反应程序为95℃预变性3min,94℃预变性2min,94℃变性50s,43.8℃退火1min,72℃延伸1min20s,35个循环,72℃最后延伸5min.用所建立的方法对21个产地的花椒样品进行测定,均可获得清晰、稳定的PCR扩增条带.
结论:本研究为RAPD分析应用于花椒的遗传多样性研究打下了良好的基础.
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