PRRSV C14-2分离株N基因的克隆与原核表达

来源 :中国畜牧兽医学会家畜传染病学分会第六届理事会第二次会议暨教学专业委员会暨第六届代表大会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:afei137
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通过RT-PCR特异性扩增出PRRSV C14-2分离株的N基因全序列,并进行了pUCm-T载体克隆,构建了pET-32a-N原核表达载体.重组菌pUCmT-N的PCR鉴定均获得了大小约380bp的DNA条带.质粒pUCmT-N的BamHI/SalI酶切获得了大小约380bp与2.7kb的两条带;质粒pET-32a-N的双酶切获得了大小跃380bp及5.9kb的两条带.N基因的序列比对结果表明C14-2分离株与美洲型毒株同源性较高;系统进化发育树构建结果证实了C14-2株属于美洲型毒株.Western-blotting鉴定结果表明重组N蛋白具有抗原活性,为今后建立以重组蛋白为抗原检测PRRS的方法打下基础.本研究对于PRRS的流行病学调查、病原学研究及诊断防治均提供了基础材料.
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