河豚毒素的薄层色谱法定量分析

来源 :中国第五届海洋湖沼药物学术开发研讨会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:snmydmyd
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1目的建立用于TTX的分离、鉴定、定量及相关研究的TLC方法。2方法将TTX样品溶液喷加到硅胶-CMC薄层板上,用S1:异丙醇-醋酸-水,14:1:5(V/V)、s2:正丁醇-醋酸-水,2:1:1(V/V)或S3:正丁醇-醋酸-水-甲苯,14:7:7:3.5(V/V)在双底展开缸上行展开180mm。将展开后挥去溶剂的薄层板浸人3mol/L的KOH溶液中狲钟,取出,用吹风机吹干溶剂后,在160℃下烘15min-20min,至TTx斑点呈黄褐色,然后,在可见(W灯,460nm)或紫外D2灯,230nm或278nm)光下扫描测定其吸光度,或者在365nm(Hg灯,滤光片400nm)激发光下测其荧光,扫描原始数据被储存,可能随时调出,根据不同需要采取不同的方式进行处理。采用外标面积校正法对TTX进行定量。3结果TTX样品量在40ng-1200ng之间,响应信号(不论是激发荧光信号,还是吸收信号)与样品量之间存在着良好的线性,其线性回归方程为Y=37.1+1.8X,相关系数r=0.9995。校正线基本通过原点。最小可检测量不高于20g。对样品量水平在线性范围内TTX的重复测定(至少五次)的板内相对标准偏差一般都在士3.0℅以内,而板间相对标准偏差则不大于士5.0℅,标准添加法测得的TTX 回收率为104.0℅(RSD2.8℅,n=5)。TLC法与高效液相色谱法对同一样品的测定结果具有很好的一致性。4.结论建立了TTX的薄层色谱定量分析方法。由于TTX的结构与理化性质上的特殊性,一直给其分析检测带来麻烦。薄层色谱技术本身固有的一些特点,使其比任何以往的分析方法能够更好地解决TTX检测和测定中所遇到的问题。该方法简单易行、方便灵活、灵敏度高、重复可靠,适合于痕量TTX的定量分析,将在TTX的资源调查、TTX及其衍生物的研究。以及TTX药用开发中的质量控制分析等方面,发挥其重作用。
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