论文部分内容阅读
超分辨荧光成像技术已经取得了特异性标记分子纳米级的定位精度,但荧光显微镜无法解析标记生物分子周围细胞环境的精细结构。超分辨荧光成像和电镜成像的融合可以把特异性标记的生物分子和它的结构以及所处的细胞微环境结构关联在一起。该技术是目前超分辨研究领域的热点和难点。我们搭建了一套能针对冷冻样品的超分辨光电融合成像系统,可以把标记的分子精确的定位在原始的精细细胞结构上。实验证明有些荧光蛋白在冷冻条件下依然保持光激活特性,并且比常温下发出更多的光子,因此也取得了更高的定位精度。通过高压冷冻和冷冻切片制备的冷冻含水样品,可以最大程度上保持样品的原始状态,并有效保持了荧光信号。通过优化成像条件,发现用Dronpa 标记的HEK293 细胞取得了比现有报道数据高2~3 倍的定位精度。我们首次在哺乳动物细胞上实现了光镜下标记的线粒体外膜蛋白和电镜下观察的外膜结构在三维空间上纳米精度的融合成像。