一种高效转染西藏小型猪胚胎成纤维细胞的方法

• 作 者: 刘薇 陈燕 岳敏 袁进 肖东 顾为望
• 机 构: 南方医科大学1比较医学研究所暨实验动物中心,广州510515
• 出 处: 2016华南实验动物科学国际研讨会、第三届实验小型猪国际论坛暨广东·九州实验动物学术交流会
• 发表日期: 2016年10期
• 关键词: 西藏小型猪 胚胎成纤维细胞 转染 核转染 脂质体转染

　　目的 应用Nucleofector Ⅱ核转染仪将外源基因EGFP导入西藏小型猪胚胎成纤维细胞(PEFs),并与脂质体转染的方法进行比较,寻求一种高效转染猪胚胎成纤维细胞的方法。方法 使用Lonza公司的Nucleofector Ⅱ核转染仪,参考已报道的转染程序与相应的转染试剂,将绿色荧光蛋白(GFP)基因导入西藏小型猪PEFs,并与脂质体转染的方法进行对比研究,比较两种方法的转染效率。结果 转染5小时后,核转染仪组镜下即可见绿色荧光,转染效率高达80％,远远高于脂旨质体转染的方法。结论 用NucleofectorⅡ核转染仪能实现西藏小型猪PEFs的高效转染,为高效制备转基因克隆西藏小型猪提供了可靠的方法。