【摘 要】
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在地球上存在着多种多样的高盐环境,在这些高盐环境中分布着不同类群的微生物,如嗜盐和耐盐的细菌、古菌及藻类等.为适应其特殊的生存境,微生物在代谢途径、酶学特性、细
【机 构】
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中南大学生命科学学院,湖南长沙410013
【出 处】
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第七届全国微生物资源学术暨国际微生物系统与分类学研讨会
论文部分内容阅读
在地球上存在着多种多样的高盐环境,在这些高盐环境中分布着不同类群的微生物,如嗜盐和耐盐的细菌、古菌及藻类等.为适应其特殊的生存境,微生物在代谢途径、酶学特性、细胞膜结构、蛋白质核酸等各个方面都展示出耐盐的特异性.本研究从山西省运城盐湖分离到一株产胞外蛋白酶的中度嗜盐菌YH4,经初步鉴定为盐弧菌,命名为Salinivibrio sp.YH4.利用离子交换和凝胶过滤层析从发酵的粗酶液中分离纯化出蛋白酶YH4-1,对其进行质谱鉴定、全基因克隆及酶学性质分析.质谱结果显示蛋白酶YH4-1为金属蛋白酶,分子量为38 kDa,金属蛋白酶抑制剂OP可完全抑制YH4-1活性.酶学性质研究发现YH4-1的最适反应温度为55℃,最适pH为9.0,该酶在碱性条件下活性较高,属于碱性蛋白酶.热稳定较好,60℃保温一小时酶活仅下降15％.该蛋白酶还具有较高的耐盐性,10％盐浓度处理蛋白酶30 min,蛋白酶活力剩余85％左右.利用TAIL-PCR获得蛋白酶YH4-1全基因序列,共1836bp,对应611个氨基酸,利用CDD数据库分析表明,酶YH4-1含有4个保守结构域,包括一个FTP结构域(G56～A105)；一个PepSY结构域(D123～W194),一个M4_neutral_protease结构域(V241～V501)和一个PPC结构域(S530～G599).本研究为嗜盐菌及其胞外蛋白酶的生产和应用奠定了一定的理论基础.
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