体外培养脂肪干细胞向心肌细胞诱导的实验研究

来源 :第一届华北心脏病学术会议暨河北省心血管病2008学术年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:sun3kai
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  目的:研究诱导体外培养脂肪干细胞(ADSCs)向心肌细胞分化的方法。方法:原代脂肪干细胞培养取材自5月龄健康新西兰大白兔。Giemsa染色观察培养细胞形态,CD34,CD44,CD105抗体标记,运用流式细胞仪进行脂肪干细胞鉴定。使用第3代细胞,加入含有10umol/L的5-aza的完全培养液进行药物诱导条件下常规培养,24h后更换为不含5-aza的完全培养液继续培养。Annexin-V-FITC标记细胞流式细胞仪进行细胞活性率检测,抗横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T单克隆抗体标记后运用流式细胞仪和免疫细胞化学染色鉴定心肌细胞特异性抗原。结果:流式细胞仪检测结果示,第3代ADSCs高表达间充质干细胞特异抗原CD44、CD105,不表达CD34;表达HLA-1抗原,不表达HLA-II抗原。流式细胞仪检测培养细胞中活细胞比例96.37%。经5-aza诱导24h后,细胞形态变为不规则星状及杆状,类似于心肌样细胞生长。诱导后21d免疫细胞化学检测横纹肌肌动蛋白及心肌特异性肌钙蛋白T呈阳性,流式细胞仪显示心肌细胞特异性抗原阳性细胞为94%。结论:脂肪干细胞具有向心肌细胞分化的可能,在组织工程学及干细胞移植领域有着良好的应用前景。
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