【摘 要】
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目的：通过对椎间盘软骨终板细胞内Ⅰ,Ⅱ型胶原mRNA的水平进行定量测定,进一步明确软骨细胞在损伤后纤维化修复过程中的细胞学功能变化规律.方法：选用健康新西兰兔40只,随机
【出 处】
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第七届西部骨科论坛暨青海省骨科年会
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目的：通过对椎间盘软骨终板细胞内Ⅰ,Ⅱ型胶原mRNA的水平进行定量测定,进一步明确软骨细胞在损伤后纤维化修复过程中的细胞学功能变化规律.方法：选用健康新西兰兔40只,随机分为四个不同的实验组(1.纤维环穿刺组2.上位软骨终板单次穿刺组,3.上下位软骨终板多次穿刺组4.假手术组),分别于动物建模手术术后第2天、第2、8、12、24周在每组中随机选取2只实验动物获取椎间盘标本,逆转录聚合酶链反应RT-PCR测定椎间盘软骨终板细胞Ⅰ,Ⅱ型胶原mRNA水平.首先提取椎间盘软骨终板组织的RNA,通过核酸测定仪上测定RNA浓度及RNA浓度与蛋白浓度比值,采用Revertaid M-Mulv逆转录酶进行逆转录,设计Ⅰ、Ⅱ型胶原引物,建立PCR反应体系,用0.5×TBE电泳缓冲液配制2％的琼脂糖凝胶电泳(120V,40min),紫外灯下观察扩增结果,测定不同电泳条带的灰度值.结果：Ⅰ、Ⅱ型胶原mRNA的变化：术后各手术组Ⅰ型胶原mRNA水平在术后8周后呈现进行性上升的趋势,上升的幅度与损伤程度相关.Ⅱ型胶原的mRNA水平在术后两周的纤维环穿刺组及上位终板单次穿刺组中开始两周内出现一过性的上升,随后开始进行性下降；而在上下位软骨终板多次穿刺组则从术后开始一直呈现下降的趋势.结论：1.损伤椎间盘髓核组织内软骨细胞Ⅰ型胶原的合成量随时间呈现持续升高的趋势,而Ⅱ型胶原的合成量在小幅升高后开始进行性下降.2、Ⅰ、 Ⅱ型胶原在损伤椎间盘软骨细胞内的形成变化规律有别于自然退变.
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