【摘 要】
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以荔枝优质品种桂味(Litchi chinensis cv.Guiwei)为材料,应用cDNA-AFLP (cDNA-Amplified Fragment Length Polymorphism)以及相关分子生物学技术,从蛋白质及基因表达水
【机 构】
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华南农业大学热带亚热带生态研究所,广州,510642
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以荔枝优质品种桂味(Litchi chinensis cv.Guiwei)为材料,应用cDNA-AFLP (cDNA-Amplified Fragment Length Polymorphism)以及相关分子生物学技术,从蛋白质及基因表达水平研究荔枝蝽(Tessartoma papillosa)为害及外源信号物质茉莉酸甲酯(Methyl jasmonate,MeJA)处理对荔枝的化学防御相关酶以及防御基因表达的影响.荔枝蝽取食荔枝叶片48h后,荔枝叶片的多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性均显著高于健康对照,也高于24h的活性.外源MeJA诱导48h后,增强了荔枝叶片POD和CAT活性,PPO没有显著差异.以健康桂味幼苗为对照,选用2对EcoRⅠ/MseⅠ引物组合分别对荔枝蝽取食48h和外源MeJA处理48h的荔枝叶片进行cDNA-AFLP分析,共检测到约250个转录基因片段,选取25条差异性表达片段进行克隆、测序,综合序列的功能分析可将它们分为解毒、蛋白合成、信号传导蛋白、AFLP-Marker、核糖体RNA、家族蛋白和功能未知等7种基因类型.在所获得的7组功能基因中挑选6个有代表性的基因片段进行引物设计,并结合已有研究报道的荔枝POD3基因引物进行RT-qPCR表达分析,结果表明：虫害引起荔枝的Zn离子结合蛋白基因、萜类吲哚生物碱解毒基因、醛脱氢酶解毒基因的下调表达,但引起FMD-3 pigment信号转导基因和ATP合成酶基因的上调表达；而由MeJA引起的上调表达的基因有Zn离子结合蛋白基因、萜类吲哚生物碱解毒基因、FMD-3 pigment信号转导基因和ATP合成酶基因,下调表达的是醛脱氢酶解毒基因.本研究结果为进一步探讨荔枝的诱导防御分子机制提供参考.
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