【摘 要】
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背景与目的：探讨siRNA干扰Smad 4基因对PanIN细胞移植瘤增殖及血管形成的作用。方法：构建和筛选能特异性静默PanIN细胞中Smad4表达的最佳siRNA稳定表达质粒,稳定转染最佳siRNA
【机 构】
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上海交通大学附属瑞金医院消化内科,上海,200025
【出 处】
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2009南方消化论坛暨第五届全国肠道疾病学术大会
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背景与目的：探讨siRNA干扰Smad 4基因对PanIN细胞移植瘤增殖及血管形成的作用。方法：构建和筛选能特异性静默PanIN细胞中Smad4表达的最佳siRNA稳定表达质粒,稳定转染最佳siRNA表达质粒进入PanIN细胞,用Zeocin筛选稳定转染克隆,挑选阳性克隆、扩增,稳转后细胞命名为PanIN-S。建立PanIN及siRNA干扰组PanIN-S细胞裸鼠移植瘤模型,随机分成两组,测定各组肿瘤体积和质量,应用免疫组化方法检测并比较各组增殖细胞核抗原(PCNA)和CD31的表达及其差异。结果：成功构建了Smad4基因siRNA体系；与未干扰PanIN细胞组相比,PanIN-S组裸鼠肿瘤体积和质量显著增加(P<0.05)；组织病理学检查,符合胰腺癌(腺癌)；免疫组化结果显示PCNA和CD31表达显著增高(P<0.05)。结论：1)首次体外证实Kras突变基础上小鼠PanIN细胞Smad4基因沉默促使PanIN细胞的恶性转化；2)体内移植瘤中Smad4失活可显著促进小鼠移植瘤增殖和肿瘤微血管形成可能是其致瘤恶性转化的重要作用机制。
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