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目的 探讨RIP3调控腺泡细胞程序性坏死在急性胰腺炎(AP)重症演变中的作用.方法 不同种族鼠(BALB/c小鼠、C57/B6小鼠、ICR小鼠和S/D大鼠)采用雨蛙肽建立AP模型,分别于不同时间点收集血清和胰腺组织,通过HE染色与血清淀粉酶和脂肪酶的检测来评估胰腺的损伤,采用原位末端转移酶标记(TUNEL)法检测腺泡细胞凋亡；采用Western印迹法、免疫组织化学法及免疫荧光检测RIP1,RIP3,肿瘤坏死因子受体(TNFR)1,TNFR2,肿瘤坏死因子受体相关的死亡蛋白(TRADD)、B淋巴细胞瘤(Bcl)-2、Bcl-xL,Caspase 3,Caspase 8和Caspase 9的表达和定位.采用胶原酶法分离小鼠和大鼠的胰腺腺泡细胞,以CCK-8 (100 nmol/L)和L-精氨酸(7.5 mg/kg)处理腺泡细胞建立体外AP模型.采用免疫共沉淀检测RIP1/RIP3复合体在体内外AP模型中的形成；以Nec-1分别体内(0.5mg/kg,1.0mg/kg,2.0 mg/kg)和体外(15 μmol/L,30 μmol/L,60 μmol/L)干预后,观察AP严重程度及腺泡细胞坏死的变化.以小于扰RNA(siRNA)干扰RIP1,RIP3后,观察CCK-8诱导的大鼠及小鼠腺泡细胞死亡的变化.结果 在小鼠雨蛙肽模型中的腺泡细胞死亡以坏死为主,而在大鼠雨蛙肽模型中以凋亡为主.在3种小鼠AP模型中,ICR小鼠胰腺损伤最为明显,BALB/c小鼠次之,C57/B6小鼠最轻.在大鼠雨蛙肽模型中,Western印迹检测发现,凋亡相关蛋白Caspase 3,Caspase8和Caspase9存在不同程度的激活,且RIP1及RIP3存在明显的分裂.在小鼠AP模型中,RIP1蛋白在C57/B6和BALB/c小鼠的胰腺中均上调,在ICR小鼠胰腺中却下调；相反,RIP3蛋白在ICR小鼠胰腺中上调最为显著；TNFR1,TRADD及Bcl-xL在3种小鼠AP模型中亦发生不同程度的上调；RIP1及RIP3主要定位于坏死腺泡细胞的胞质.RIP1和RIP3蛋白在小鼠体内AP模型中发生结合,但在体外不结合；Nec-1体内干预不能减轻雨蛙肽诱导的胰腺损伤,Nec-1或siRNA干扰RIP1亦不能抑制CCK-8或L-精氨酸诱导的小鼠腺泡细胞坏死；siRNA干扰RIP3表达可部分逆转CCK-8或L-精氨酸诱导的小鼠腺泡细胞坏死；siRNA干扰RIP1则加重CCK-8诱导的大鼠腺泡细胞坏死.结论 当RIP1表达被抑制时,RIP3介导的腺泡细胞程序性坏死信号被激活并促进AP的重症演变,RIP1高表达则调控腺泡细胞转向凋亡途径从而保护腺泡细胞坏死.