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目的:调查临床分离碳青霉烯类耐药非发酵菌产碳青霉烯酶的情况,探讨产酶菌株可移动遗传元件分布.方法:对中南大学湘雅医院2011年10月—2012年3月临床各类标本中非重复碳青霉烯类耐药非发酵菌进行细菌培养、鉴定及药敏试验;采用2种改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型确证;聚合酶链式反应(PCR)检测主要碳青霉烯酶基因blaKPC、blaIMP、blaVIM-1、blaVIM-2、blaSPM、blaNDM-1、blaOXA-23、blaOXA-40和blaOXA-58;对碳青霉烯酶基因扩增阳性菌株再进行11种可移动遗传元件如整合子遗传标记(intI 1、intI2、intI 3)、转座子遗传标记(merA、tnpU、tnp513、tnpA)、插入序列遗传标记(ISAba1、IS26)及接合性质粒遗传标记(traA、trbC)的PCR扩增.结果:分离的82株碳青霉烯类耐药非发酵菌,包括27株铜绿假单胞菌和55株鲍曼不动杆菌,对多数抗菌药物耐药严重,耐药率大多在60%以上而对阿米卡星和头孢哌酮/舒巴坦耐药率最低.采用大肠埃希菌ATCC 25922作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株37株(45.1%),阴性菌株38株(46.34%),不确定结果7株(8.5%).采用肺炎克雷伯菌ATCC 700603作为指示菌株的改良Hodge试验阳性菌株14株(17.1%),阴性菌株66株(80.5%),不确定结果2株(2.4%).1株铜绿假单胞菌携带VIM-2型基因,11株鲍曼不动杆菌携带blaOXA-23基因,这12株菌每株至少检出3种可移动遗传元件,最多检出5种可移动遗传元件,其中大部分受试菌携带4种可移动遗传元件.未扩增出其他碳青霉烯酶基因及可移动遗传元件基因.结论:我院碳青霉烯类耐药非发酵菌以鲍曼不动杆菌为主,大部分为多重耐药菌株,仅对头孢哌酮/舒巴坦和阿米卡星较敏感,主要耐药机制为携带碳青霉烯酶基因blaOXA-23和blaVIM-2,且这些菌株易携带多种可移动遗传元件.