【摘 要】
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目的:克隆表达金黄色葡萄球菌α-溶血素并检测其免疫学活性。方法:用PCR扩增hla基因,将该基因克隆到表达载体PET28a中,获得重组质粒pET28a-Hla和点突变重组质粒pET28a-HlaH35
【机 构】
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上海生物制品研究所有限责任公司,上海200051
【出 处】
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2013中国生物制品年会暨第十三次全国生物制品学术研讨会
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目的:克隆表达金黄色葡萄球菌α-溶血素并检测其免疫学活性。方法:用PCR扩增hla基因,将该基因克隆到表达载体PET28a中,获得重组质粒pET28a-Hla和点突变重组质粒pET28a-HlaH35L,在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导表达,纯化重组蛋白,检测其溶血活性及其抗血清的抑制溶血活性,用小鼠滴鼻攻击模型评价重组蛋白的免疫保护性。结果:成功构建重组质粒,纯化获得高纯度重组蛋白;Hla具有溶血活性,而脱毒Hla和HlaH35L没有溶血活性;抗Hla和抗HlaH35L血清均具有抑制溶血活性;在滴鼻攻击模型中,HlaHm具有较好的免疫保护性。结论:Hla具有良好的免疫学活性,有望成为候选疫苗组分。
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