论文部分内容阅读
目的：克隆并原核表达Modesto株C型副鸡禽杆菌的血凝素基因，鉴定该重组血凝素的生物学活性。
方法：根据GenBank上已发表的Modesto株Apg的血凝素基因序列，设计合成了1对特异性引物，克隆Apg血凝素基因。以Modesto株Apg中提取的细菌DNA为模板，利用PCR扩增Apg血凝素全长基因(1026bp)，将其克隆到pET-32a(+)载体上，构建了pET-HA原核表达载体pET-HA，表达并纯化重组蛋白，通过Western-blotting及血凝和血凝抑制试验鉴定该重组蛋白的生物学活性。
结果：表达并纯化了Apg HA重组血凝素蛋白，该蛋白可以和C型Apg抗血清特异性结合，并且可以凝集鸡红细胞。
结论：成功地构建了Modesto株Apg血凝素基因的原核表达载体，并表达纯化了Apg-HA融合蛋白，该重组血凝素具有凝集鸡红细胞的活性，为进一步研究Apg-HA的免疫功能奠定基础。