【摘 要】
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本研究根椐GenBank中登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)经典株和变异株、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRoV)、猪星状病毒(PAstV)基因序列,分别设计5对引物,在建立各病毒单一RT-PCR技术的基础上,优化多重RT-PCR反应条件,建立了一种特异性强、灵敏度高的能同时检出多种病毒的多重RT-PCR检测方法.通过特异性试验证实该法能特异性的检测PEDV、TGEV、PRoV、P
【机 构】
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广西大学动物科学技术学院,广西南宁530005
【出 处】
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广西兽医协会、广西畜牧兽医学会畜禽传染病学分会2017年学术年会
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本研究根椐GenBank中登录的猪流行性腹泻病毒(PEDV)经典株和变异株、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪轮状病毒(PRoV)、猪星状病毒(PAstV)基因序列,分别设计5对引物,在建立各病毒单一RT-PCR技术的基础上,优化多重RT-PCR反应条件,建立了一种特异性强、灵敏度高的能同时检出多种病毒的多重RT-PCR检测方法.通过特异性试验证实该法能特异性的检测PEDV、TGEV、PRoV、PAstV,而与猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRSV)病毒、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)无交叉反应;重复性试验获得一致的目的片段;敏感性试验显示能检出的混合质粒最低限度为8.41×101copies/μL.结果表明,本研究建立的猪腹泻相关病毒多重RT-PCR检测方法高效、敏感、特异,可用于PEDV经典株与变异株、TGEV、PRoV、PAstV的快速鉴别诊断和流行病学调查.
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为建立猪Delta冠状病毒(PDCoV)的TaqMan实时荧光定量RT-PCR检测方法,根据GenBank登录的PDCoVN基因序列在保守区设计合成特异性引物和TaqMan探针,构建含有PDCoV N基因的重组质粒作为阳性标准品,通过优化各项反应条件,建立了检测PDCoV的TaqMan实时荧光定量RT-PCR方法,并对该方法进行特异性、定量线性范围、敏感性和重复性等试验.结果表明,该方法仅对PDC
目的:建立可视化检测猪伪狂犬病毒的环介导等温扩增技术,为临床检测PRV提供技术支撑.方法:本研究根据GenBank中PRVgB基因的保守序列,设计一套特异性引物,并对反应条件进行优化,建立了PRV的LAMP可视化检测方法.结果:该方法能在常规水浴锅65℃30min内实现对目的片段的大量扩增,检测结果可通过肉眼观察颜色直接判定,该方法具有很高的特异性,与猪瘟病毒、猪圆环病毒2型等均无交叉反应;该方法
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戊型肝炎(HE)是由戊型肝炎病毒(HEV)引起的病毒性肝炎,以水源性暴发和急性散发为特点,主要通过粪-口途径传播,是一种新发重要人兽共患传染病,呈全球分布,严重危害人们身体健康和动物养殖业健康发展,是发展中国家的主要公共卫生问题之一.很多研究及病例证明了HE是一种可以通过食物或水源环境传播的人兽共患疫病,猪是HEV的重要储库.HEV编码病毒衣壳蛋白pORF2有多个重要免疫抗原表位,目前HEV基因工
2017年7月广西壮族自治区兴业县某规模化养殖场育肥猪突然发生大面积的高烧,呼吸困难等症状并引起部分猪只死亡的疫情.根据临床症状、病理剖检,病原学检查,血清学检查,最后确诊为猪伪狂犬病和蓝耳病混合感染.通过及时对发病场采取了一系列相应的措施,有效的控制了疫情的蔓延.
在前期研究中,为获得PRRSV细胞传代致弱疫苗,我们将高致病性PRRSV毒株vJX143在MARC-145细胞中连续传代,发现致弱毒疫苗株(vJXM100)nsp2特异缺失了88氨基酸.为研究该88氨基酸缺失对病毒复制和宿主细胞因子应答的影响,本研究在高致病性PRRSV毒株(vJX143)感染性克隆pMJX0612-NM基础上定点特异缺失264个核苷酸(88氨基酸),拯救重组病毒vMJX0612-
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本研究用RT-PCR方法成功克隆了9株PRRSV的Nsp2高变区基因片段与22株PRRSV的ORF5基因片段.研究表明,9株PRRSV分离株的Nsp2核苷酸同源性为77.2％～99.7％,与VR-2332的核苷酸同源性为76.6％～99.2％,与国内经典株CH-la、国内高致病性代表株TJ、JXA1核苷酸同源性分别为83.1％～90.7％,80.6％～98.2％、81.0％～98.9％,与VR-2