【摘 要】
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目的：建立一种分离、培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法,观察体外培养中MSCs的生长特性,及其潜在的诱导分化能力.方法：取兔胫骨骨髓,密度梯
【机 构】
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第四军医大学西京医院烧伤与皮肤外科·全军烧伤中心 西安710032
【出 处】
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中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会
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目的：建立一种分离、培养扩增兔骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)的方法,观察体外培养中MSCs的生长特性,及其潜在的诱导分化能力.方法：取兔胫骨骨髓,密度梯度离心法联合贴壁培养法体外纯化扩增,相差显微镜观察其形态学特点,MTT法测定绘制传代MSCs生长曲线,经成骨诱导液(L-DMEN/F12,10％ FBS,0.1 μmol/L地塞米松,50μmol/L抗坏血酸,10 mmol/L 1β-甘油磷酸钠)、成脂诱导液(L-DMEN/F12,10％ FBS,1 μmol/L地塞米松,200 μ mol/L吲哚美辛,0.5 mmol/L IBMX,10 μ g/ml胰岛素)、成软骨诱导液(L-DMEN/F12,10％ FBS,10 ng/ml TGF-β1,0.1 μ mol/L地塞米松,50 μ mol/L抗坏血酸,6.25 μ g/ml胰岛素)体外诱导MSCs向成骨细胞、脂肪细胞及软骨细胞分化,并分别经碱性磷酸酶染色、油红0染色和甲苯胺蓝染色法鉴定.结果：原代及传代MSCs为梭形.经成骨细胞诱导,细胞碱性磷酸酶染色阳性；经成脂肪细胞诱导,细胞内出现红色脂滴,经成软骨细胞诱导,甲苯胺蓝染色阳性.结论：通过密度梯度离心法联合贴壁培养法可在体外大量扩增、纯化MSCs,所获细胞具有高度自我更新能力和多向分化潜能,可用于进一步的实验研究.
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