【摘 要】
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目的:探讨新基因Lrrc75b在C2C12成肌分化过程中的影响及作用机制. 方法:(1)采用统合分析方法分析C2C12细胞成肌分化芯片,筛选出C2C12细胞成肌分化一致性差异表达的基因;(2)
【机 构】
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广东医学院药理教研室,广东 东莞 523808
【出 处】
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中国药理学会抗炎免疫药理专业委员会第十一届全国学术会议
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目的:探讨新基因Lrrc75b在C2C12成肌分化过程中的影响及作用机制.
方法:(1)采用统合分析方法分析C2C12细胞成肌分化芯片,筛选出C2C12细胞成肌分化一致性差异表达的基因;(2)建立C2C12细胞成肌分化模型,Real-time PCR检测LRRC75B在成肌分化过程的时序表达模式;(3)用Lrrc75b siRNA瞬时转染C2C12细胞,通过免疫荧光染色、westem blot检测对成肌分化标志基因的表达及相关信号通路的影响.
结果:(1)C2C12细胞在2%马血清条件下培养,细胞逐渐融合形成肌管;与诱导0天相比,随着诱导时间的延长,成肌分化标志蛋白myogenin和MyHC表达逐渐增加;qRT-PCR结果显示C2C12成肌分化过程中LRRC75B mRNA表达下调;(3)免疫荧光染色结果显示Lrrc75b干扰后,肌管面积、肌管融合指数明显增加;western blot结果显示myogenin和MyHC蛋白表达明显升高,ERK1/2磷酸化水平下调.
结论:下调Lrrc75b表达促进C2C12细胞成肌分化,可能与ERK1/2通路有关.
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