牡丹ACC合成酶基因组序列克隆及分析

来源 :2013中国洛阳国际牡丹高峰论坛 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zhanggh20060363
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  ACC合成酶是乙烯生物合成的关键酶.为了明确牡丹ACC合成酶基因的结构,基于报道的牡丹ACS cDNA(DQ337250)序列,设计一对特异性PCR扩增引物,以'洛阳红'牡丹(Paeonia suffuticosa Andr.)新鲜叶片总DNA为模板,用高保真DNA聚合酶KOD-plus成功地扩增出长度约为2 200 bp的PCR产物;用pMD18-T载体对PCR产物进行了克隆,测序结果表明牡丹ACS基因组序列全长2 251 bp,含4个外显子和3个内含子,剪接位点均为保守的5'供位GU与3'受位AG模式,4个外显子居于1-174、267-398、483-643、1240-2251 bp;序列已提交至GenBank数据库,其登录号为FJ769773;牡丹ACS蛋白共含492个氨基酸,与苹果、枇杷、西洋梨、天竺葵等ACS的相似性达74% ~76%;生物信息学分析预测牡丹ACS蛋白的分子量为54.9 kD,等电点为6.8,是一个定位于细胞质的不稳定的非分泌亲水蛋白.
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