【摘 要】
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目的 中华白蛉Phlebotomus chinensis Newstead,1843是小型吸血昆虫,在我国分布广泛,是分布地利什曼病的重要传播媒介.媒介昆虫的共生菌是近年研究的热点,基于共生菌的蚊媒和蚊媒病控制方法逐渐被应用.而关于白蛉的共生菌研究尚少,本研究在我国河南和四川现场采集中华白蛉,并分离、鉴定其中的共生菌,拟阐明两地中华白蛉的共生菌群结构.方法 应用灯诱法在河南省陕县(110.10°E
【机 构】
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第二军医大学基础医学实验教学中心,上海200433 第二军医大学热带医学与公共卫生学系热带传染病学
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目的 中华白蛉Phlebotomus chinensis Newstead,1843是小型吸血昆虫,在我国分布广泛,是分布地利什曼病的重要传播媒介.媒介昆虫的共生菌是近年研究的热点,基于共生菌的蚊媒和蚊媒病控制方法逐渐被应用.而关于白蛉的共生菌研究尚少,本研究在我国河南和四川现场采集中华白蛉,并分离、鉴定其中的共生菌,拟阐明两地中华白蛉的共生菌群结构.方法 应用灯诱法在河南省陕县(110.10°E/34.24°N,海拔985 m)和四川省九寨沟县(104.15°E/33.14°N,1503m)采集中华白蛉成虫,现场将样本分为雌性、雄性和吸血个体,RNA保存液保存,带回实验室,分别抽提基因组DNA,然后扩增细菌的rDNA 16S全长,将扩增产物连接到pTOP0-TA载体,转化至感受态细胞,挑取阳性单克隆送公司测序,所有序列在rrNDB数据库进行比对分析,必要时在GenBank中进一步BLAST搜索,确定种类.结果 共挑取了1252个中华白蛉样本共生菌的阳性克隆,rrnDB比对的结果显示,隶属5门9纲17目20科29属,6个类群无法归类.中华白蛉的核心细菌为：柠檬酸杆菌(Citrobacter spp.),复数菌(Pluralibacter spp.),假单胞菌(Pseudomonas spp.)和肠球菌(Enterococcus spp.),从菌群结构看,吸血的最为复杂,其次是雌性,较为简单的是雄性；不同地区白蛉共生菌种类也有所不同,河南的样本比四川的复杂程度高；各地还存在本土的特有细菌,如仅在河南白蛉样本中检测到立克次体(Rickettsia spp.),沃尔巴克氏体(Wolbachia spp.)和西地西菌属(Cedecea spp.)；仅在四川白蛉样本中检测到双立克次氏体(Diplorickettsia spp.)和螺原体(Spiroplasma spp.).结论 本研究获得了我国河南和四川的中华白蛉共生菌种类和菌群结构.
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