【摘 要】
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目的：用RT-PCR法检测铜对仔猪关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)mRNA基因表达水平的影响.方法：分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采有RT-PCR法扩增出IGF-I的cDNA
【机 构】
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吉林大学畜牧兽医学院,吉林 长春 130062
【出 处】
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吉林省畜牧兽医学会2005年学术年会
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目的：用RT-PCR法检测铜对仔猪关节软骨细胞中胰岛素样生长因子-I(IGF-I)mRNA基因表达水平的影响.方法：分离培养仔猪关节软骨细胞,从中提取总RNA,采有RT-PCR法扩增出IGF-I的cDNA,与PMD-18-T载体相连,转化JM109大肠杆菌,提取质粒,鉴定所扩增的片断为目的片断.培养仔猪关节软骨细胞,并在培养液中添加不同水平的铜,分别在0h、12h、24h、48h培养结束时,收集细胞,提取总RNA,采有RT—PCR法扩增出IGF-I的cDNA,以β-actin为内参,用凝胶分析系统对扩增出的cDNA进行扫描分析,计算IGF-I mRNA基因表达的相对水平.结果：在细胞培养液中添加不同水平的铜能促进软骨细胞中IGF-I mRNA基因表达,其中以31.2μmol/L效果最好.表明铜对软骨细胞的增殖作用是通过促进IGF-1mRNA的表达来实现的.
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