解脲支原体感染大鼠动物模型的建立及感染后大鼠免疫反应的研究

来源 :第6届中国皮肤科医师年会 | 被引量 : 0次 | 上传用户:l123654123654
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  目的 选择合适的动物及方法构建解脲支原体(UU)感染的动物模型,了解UU对雄性SD大鼠泌尿生殖器官的感染情况,以及感染后大鼠外周血IL-6、IL-8、TNF-α、可溶性CD4、可溶性CD8的变化和睾丸、前列腺CD4+、CD8+细胞的表达情况.方法 取性成熟雄性SD大鼠40只,晨尿离心,沉渣作解脲支原体液体培养,取UU培养阴性SD大鼠30只,随机分为两组,A组为模型组共22只;B组为对照组共8只.A组每只动物经膀胱注入血清型8型解脲支原体菌株培养液0.5ml,浓度为5×106CCU/ml.B组每只动物膀胱注入等量生理盐水.第40天再次取晨尿离心,尿沉渣作UU液体培养,阳性者再进行固体培养,再次培养阳性者,定为模型成功.取成功模型大鼠尿道、膀胱、前列腺、睾丸、附睾、精囊、输精管组织进行UU液体-固体培养,并取大鼠血液2ml,离心分离血清,采用双抗体夹心ABC -ELISA法检测IL-6、IL-8、TNF-α及大鼠可溶性CD4、CD8因子.取模型大鼠睾丸和前列腺组织进行CD4、CD8免疫组化标记.应用SPSS13.0软件对所得资料进行统计学分析,培养结果采用χ2检验,外周血细胞因子检测结果采用t检验,检验水准p=0.05.结果 模型组大鼠19只成活,3只死亡.19只成活模型组大鼠尿液沉渣UU液体、固体培养基培养均阳性.造模成功的大鼠组织UU培养阳性率分别为:尿道84.2%、膀胱42.5%、前列腺63.2%、睾丸63.2%、附睾47.4%、精囊47.4%、输精管47.4%;对照组8只尿液沉渣及组织UU培养均为阴性.模型组器官组织UU培养阳性率显著高于对照组(P<0.01).大鼠外周血细胞因子检测结果:IL-6浓度:模型组81.44±31.05 pg/ml,对照组80.73±13.23 pg/ml,模型组与对照组相比差异无显著性(p>0.05).IL-8浓度:模型组527.66±179.08 pg/ml,对照组467.62±83.21pg/ml,模型组与对照组相比IL-8浓度差异无显著性(p>0.05).TNF-α浓度:模型组49.27±7.26pg/ml,对照组51.31±8.70pg/ml,模型组与对照组相比差异无显著性(p>0.05).可溶性CD4浓度:模型组1116.68±239.45pg/ml,对照组1026±143.72pg/ml,模型组与对照组相比差异无显著性(p>0.05).可溶性CD8浓度:模型组4522.25±505.56pg/ml,对照组4529.12±291.10 pg/ml,模型组与对照组相比CD8+浓度差异无显著性(p>0.05).可溶性CD4/CD8比值:模型组0.25±0.07,对照组0.22±0.04,模型组与对照组相比CD4+/CD8+比值差异无显著性(p>0.05).免疫组化检测结果:睾丸和前列腺组织免疫组化标记CD4+、CD8+细胞均阴性.结论 1、用UU标准株血清型8型,浓度为5×106CCU/ml经膀胱注入,经过接种40天后,感染可广泛并不同程度侵犯大鼠泌尿生殖器官,引起大鼠泌尿道及前列腺、睾丸等组织的感染,成功建立UU感染大鼠的动物模型.2、UU感染后大鼠体液免疫、细胞免疫、局部组织细胞免疫反应均不明显.提示UU感染以泌尿生殖直接侵入为主,造成组织损伤.
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