尼罗罗非鱼cyp19a1a多克隆抗体制备及高温诱导对其表达的影响

• 作 者: 王金 文春根 季相山
• 机 构: 南昌大学生物科学系,江西南昌330031
• 出 处: 第八届南方六省(粤、湘、鄂、赣、桂、琼)动物学学术研讨会
• 发表日期: 2014年期
• 关键词: 尼罗罗非鱼 多克隆抗体制备 高温诱导 原核表达 重组蛋白 非哺乳动物 Westernblotting 中枢神经系统

　　芳香化酶参与哺乳动物中枢神经系统的发育，调节神经内分泌，影响繁殖功能和性行为；并且可以调控非哺乳动物性腺分化，影响多种鱼类的性别分化和性别决定.本文通过RT-PCR技术获得尼罗罗非鱼cyp19a1aORF区，并进行了原核表达，纯化了重组蛋白，免疫小鼠制备了多克隆抗体，结果显示在0.5mM/LIPTG诱导8h后cyp19a1a重组蛋白大量表达，并以包涵体形式存在.通过Ni2+-NTA层析柱和切胶纯化后获得与预期片段大小一致的表达蛋白，并用Westernblotting验证了纯化的蛋白是目的蛋白.