CD14和TLR4受体在牙髓卟啉单胞菌脂多糖诱导成骨细胞IL-6表达中的作用

来源 :全国第八次牙体牙髓病学学术会议 | 被引量 : 0次 | 上传用户:waitvl
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  目的:探讨CD14和TLRs受体在牙髓卟啉单胞菌(porphyromonasendodontalis,P.e)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导成骨细胞IL-6表达中的作用.方法:10 μg/mL的P.e-LPS作用于MC3T3-E1细胞不同时间(0~24h),RT-PCR检测细胞CD14、TLR2及TLR4mRNA的表达;流式细胞仪检测CD14、TLR2、TLR4的阳性细胞率;免疫荧光技术检测细胞表面CD14、TLR2及TLR4的表达变化.抗小鼠CD14、TLR2及TLR4抗体预处理细胞后,RT-PCR法检测P.e-LPS诱导细胞IL-6mRNA表达的变化.应用SPSS11.0软件包对结果进行单因素方差分析Dunnett-t检验.结果:10 μ g/mL的P.e-LPS作用于MC3T3-E1细胞后,细胞表面CD14和TLR4的mRNA(1~12h,P<0.01)和蛋白表达显著增多,但TLR2表达无明显变化;免疫荧光染色可观察到P.e-LPS作用后CD14,TLR4的荧光表达明显增强,而TLR2则无明显变化.中和抗体实验证明CD14或TLR4抗体均可部分的阻断P.e-LPS诱导的IL-6mRNA的表达,TLR2抗体则并无此作用.结论:P.e-LPS作用于成骨细胞MC3T3-E1诱导其炎症因子IL-6的产生依赖于CD14和TLR4受体,与TLR2无关.
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