【摘 要】
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本研究通过筛选具有较好热稳定性的中温酸性α-淀粉酶生产菌株,分析其酶学特性；研究该菌株产酸性α-淀粉酶基因的结构特征,探讨该基因原核表达特点；运用PCR技术克隆得到该
【机 构】
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华南农业大学动物科学学院,广州510642
【出 处】
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中国畜牧兽医学会动物营养学分会第七届中国饲料营养学术研讨会
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本研究通过筛选具有较好热稳定性的中温酸性α-淀粉酶生产菌株,分析其酶学特性；研究该菌株产酸性α-淀粉酶基因的结构特征,探讨该基因原核表达特点；运用PCR技术克隆得到该菌株产酸性α-淀粉酶基因的全序列,并对该序列进行生物信息学分析；通过构建pET-Amy载体,转化到大肠杆菌BL21中进行原核表达,且对原核表达的条件做了初步的优化；采用His标记蛋白纯化柱对重组蛋白进行了纯化,然后对纯化后的重组酸性α-淀粉酶进行了基本酶学性质的检测与分析.结果表明,通过淀粉水解透明圈直径/菌落直径初筛法、结合液体发酵酶活力测定复筛法,从30份样品中筛选得到一株高产中温酸性α-淀粉酶的菌株Z J-1,它的初始产酶活力为(56.5±0.7)U/mL,达到国内较高水平.
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