【摘 要】
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为了研究地黄环烯醚萜生物合成途径的功能基因,从地黄中克隆了一条新的GGPPS基因(RgGGPPS2),进行生物信息学分析,原核表达、纯化及基因表达模式分析.RgGGPPS2基因的ORF为867b
【机 构】
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河南中医药大学药学院郑州450046;呼吸疾病诊疗与新药研发河南省协同创新中心郑州450046河南中医药大学药学院郑州450046
【出 处】
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2016全国中医药生物化学与分子生物学年会
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为了研究地黄环烯醚萜生物合成途径的功能基因,从地黄中克隆了一条新的GGPPS基因(RgGGPPS2),进行生物信息学分析,原核表达、纯化及基因表达模式分析.RgGGPPS2基因的ORF为867bp,编码289个氨基酸.生物信息学分析结果发现RgGGPPS2蛋白含有2个富含天冬氨酸的基序FARM(first aspartate-rich motif)和SARM(second aspartate-rich motif),RgGGPPS2与芝麻、长春花等双子叶植物中GGPPS蛋白的同源性较高.通过构建pET-32a-RgGGPPS2原核表达载体在大肠杆菌BL21(DE3)菌株中成功表达RgGGPPS2重组蛋白,利用Ni2+亲和层析得到了纯化的RgGGPPS2重组蛋白.荧光定量PCR结果显示RgGGPPS2基因在根中表达量最高,其次是叶,茎中最低.这为进一步研究RgGGPPS2基因在地黄环烯醚萜生物合成途径中的功能奠定了基础.
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